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第一篇　医学生物化学与分子生物学实验基础知识1

第一章 医学生物化学与分子生物学实验一般知识1

第一节　医学生物化学与分子生物学实验的基本特点1

第二节 实验室安全及规则2

第三节 实验报告书写3

第二章　基本实验操作5

第一节　洗涤和干燥5

第二节 常用的实验操作技术6

第三章　实验仪器简介9

第一节　分光光度计9

第二节 离心机10

第三节 高效液相色谱仪11

第四节 电泳仪13

第五节 PCR仪14

第六节 真空冷冻干燥机16

第七节 高压蒸汽灭菌锅17

第八节　恒温培养箱18

第九节 生物安全柜21

第二篇 医学生物化学与分子生物学基本技术原理22

第四章　分光光度技术22

第一节 分光光度技术基本原理22

第二节 （722型）分光光度计的简介24

第五章　离心技术25

第一节 离心技术基本原理25

第二节 离心机的组成27

第三节 离心方法30

第六章　电泳技术35

第一节 电泳技术发展简史35

第二节 电泳基本原理35

第三节 影响电泳分离的主要因素36

第四节 电泳分类38

第五节 常见电泳技术39

第七章　层析（色谱）技术44

第一节 层析（色谱）技术发展简史44

第二节 层析的分类44

第三节 层析方法的一般原理45

第四节 常见的层析技术46

第八章　核酸的分离与纯化54

第一节　核酸分离的原则54

第二节 核酸分离的主要步骤55

第三节　核酸的纯化55

第四节　核酸浓度的测定55

第五节　核酸的保存56

第九章　聚合酶链反应（PCR）57

第一节 PCR的基本原理57

第二节 PCR反应条件58

第三节 常见的几种PCR技术59

第四节　PCR技术的应用及其注意事项62

第十章　印迹技术64

第十一章　基因工程66

第一节　基因工程发展简史66

第二节 基因工程基本原理66

第三节　基因工程的基本过程71

第三篇　医学生物化学与分子生物学基础实验75

第十二章　蛋白质75

实验一　蛋白质的定性试验75

实验二 离子交换层析分离氨基酸80

实验三　凝胶层析法分离蛋白82

实验四　蛋白质定量分析83

实验五　血清蛋白的乙酸纤维薄膜电泳90

第十三章　酶学93

实验一　酶定性93

实验二 丙二酸抑制琥珀酸脱氢酶实验97

实验三　琼脂糖凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶99

实验四　碱性磷酸酶Km测定101

实验五　3-磷酸甘油醛脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性103

第十四章　糖代谢107

实验一　运动对骨骼肌糖代谢的影响107

实验二　血糖浓度测定109

实验三　肾上腺素和胰岛素对家兔血糖浓度的影响112

实验四　肝糖原的提取和鉴定112

第十五章　脂代谢114

实验一　磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯测定114

实验二　血清总胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇115

实验三　血清总胆固醇的测定——邻苯二甲醛直接显色法116

实验四 酮体的生成及鉴定117

实验五　琼脂糖凝胶电泳分离血清脂蛋白119

第十六章　氨基酸代谢121

实验一　血清丙氨酸氨基转移酶活性测定121

实验二　氨基移换及精氨酸酶在尿素形成中的作用123

第十七章　分子生物学基础实验127

实验一 细菌质粒DNA的提取及紫外吸收法测定核酸的含量127

实验二　质粒DNA提取（质粒小量提取试剂盒）129

实验三　PCR扩增130

实验四 琼脂糖凝胶电泳分离DNA131

实验五　肝组织中核酸的提取和核酸组分的鉴定133

实验六　真核基因组DNA的提取137

实验七 真核细胞RNA提取139

实验八 RT-PCR方法141

实验九 荧光定量PCR测定培养Hela细胞中GAPDH的含量142

第四篇　医学生物化学与分子生物学综合设计实验150

第十八章　蛋白质和酶的纯化150

实验一　血清中IgG的分离纯化150

实验二　红细胞中SOD分离纯化及活性鉴定155

第十九章　IL-29基因亚克隆及其在大肠埃希菌中表达159

实验一　PCR扩增目的基因及其琼脂糖凝胶电泳回收159

实验二 质粒DNA及目的基因的限制性内切酶酶切162

实验三 质粒DNA与目的基因的连接163

实验四 感受态细胞的制备及转化164

实验五 阳性克隆的筛选167

实验六　克隆基因的诱导表达170

第二十章　原核表达IL-29分离纯化172

实验一 包涵体的制备、洗涤172

实验二 包涵体的裂解和洗涤174

实验三 目的蛋白质Ni2＋金属离子螯合层析分离纯化175

实验四　Western-blot鉴定177

第二十一章　IL-29复性及活性鉴定180

实验一　纯化蛋白的复性180

实验二 IL-29诱导Hela细胞中2′5′-寡聚腺苷酸合成酶（2′5′-OAS）的荧光定量PCR分析181

第二十二章　自主设计实验184

实验一 凋亡细胞DNA片断的琼脂糖电泳分析184

实验二　酪蛋白等电点的测定185

实验三　双荧光报告基因重组体的转染及荧光显微镜观察187

实验四 牛血清白蛋白聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳188

实验五 完全自主设计实验188

附录190

附一　常用缓冲溶液的配制190

附二　常用酸碱摩尔溶液的配制196

附三　常用酸碱指示剂的配制197

附四　常用抗凝试剂的配制197

附五 国际单位制的基本单位198