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第1章　绪论1

1.1　分子生物学技术发展简史1

1.2　DNA重组的一般过程5

1.3　分子生物学技术的应用12

第2章 分子生物学实验室常用仪器设备及安全注意事项13

2.1　分子生物学实验室常用仪器设备13

2.2　分子生物学实验室安全注意事项19

第3章　分子生物学实验基本操作技术23

3.1　除（灭）菌技术23

3.2　无菌操作技术28

3.3　微量操作技术30

第4章　分子克隆常用工具酶和载体32

4.1　分子克隆常用工具酶32

4.2　常用载体37

4.3　宿主细胞39

第5章　核酸定量测定技术——紫外分光光度法41

5.1　主要内容41

5.2 目的要求41

5.3　实验原理42

5.4　材料、试剂及器材42

5.5　方法与操作步骤43

第6章　核酸标记技术46

6.1　主要内容47

6.2 目的要求47

6.3　实验原理47

6.4　材料、试剂与器材48

6.5　方法与操作步骤49

第7章　琼脂糖凝胶电泳技术52

7.1　主要内容53

7.2 目的要求53

7.3　实验原理53

7.4　材料、试剂及器材55

7.5　方法与操作步骤56

第8章　聚丙烯酰胺凝胶电泳技术60

8.1　主要内容62

8.2 目的要求62

8.3　实验原理62

8.4　材料、试剂与器材64

8.5　方法与操作步骤65

第9章 动物组织中DNA的提取与纯化70

9.1　主要内容70

9.2 目的要求70

9.3　实验原理71

9.4　材料、试剂及器材71

9.5　方法与操作步骤72

第10章 动物组织总RNA的提取及定量75

10.1　主要内容75

10.2 目的要求75

10.3　实验原理76

10.4　材料、试剂及器材76

10.5　方法与操作步骤76

第11章　大肠杆菌感受态细胞的制备和转化79

11.1　主要内容79

11.2　目的要求79

11.3　实验原理80

11.4　材料、试剂及器材81

11.5　方法与操作步骤82

第12章 质粒DNA的提取、纯化与电泳鉴定85

12.1　主要内容85

12.2 目的要求86

12.3　实验原理86

12.4　材料、试剂及器材87

12.5　方法与操作步骤88

第13章　重组子的构建与筛选鉴定93

13.1　主要内容93

13.2　目的要求93

13.3　实验原理94

13.4　材料、试剂与器材94

13.5　方法与操作步骤96

第14章 目的基因在大肠杆菌中的表达与检测99

14.1　主要内容100

14.2 目的要求100

14.3　实验原理100

14.4　材料、试剂与器材101

14.5　方法与操作步骤101

第15章　聚合酶链式反应104

15.1　主要内容104

15.2　目的要求104

15.3　实验原理104

15.4　材料、试剂与器材106

15.5　方法与操作步骤106

第16章　Southern杂交技术112

16.1　主要内容113

16.2 目的要求113

16.3　实验原理113

16.4　材料、试剂及器材115

16.5　方法与操作步骤116

第17章　Northern杂交技术120

17.1　主要内容120

17.2 目的要求120

17.3　实验原理120

17.4　材料、试剂及器材121

17.5　方法与操作步骤123

第18章 免疫印迹技术——Western Blot128

18.1　主要内容128

18.2 目的要求129

18.3　实验原理129

18.4　材料、试剂及器材130

18.5　方法与操作步骤131

第19章　实验记录、数据处理与结果分析138

19.1　实验记录138

19.2　数据处理140

19.3　结果分析与结论143

第20章　实验报告146

附录149

一、常用缓冲溶液的配制方法149

二、常用电泳上样缓冲液151

三、常用限制性核酸内切酶的识别序列及切点152

四、常用宿主细胞及特点152

五、常用蛋白酶与核酸酶的配制及使用浓度154

六、常用培养基154

七、常用抗生素的配制及使用浓度155

八、琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶的浓度及其有效分离范围155

九、不同浓度聚丙烯酰胺凝胶的配制方法156

十、蛋白质和核酸常用分子质量标准157

参考文献160